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抗病毒活性試驗是將病毒分別接種在試樣和對照樣上,在特定的接觸時間后,計數剩余的感染性病毒數量(病毒感染滴度),以抗病毒試樣和對照樣試樣中剩余感染性病毒的平均對數值的差值作為病毒減少值,或以抗病毒試樣和對照樣試樣中剩余感染性病毒數量的平均值來計算病毒減少率。病毒感染滴度采用噬斑法或TCID50法測定。
抗病毒活性試驗-國家檢驗檢測中心
抗病毒活性試驗步驟
1、試樣準備
所有試樣均置于帶蓋樣品瓶中備用。
如果將培養皿試驗條件下放入培養箱時,能保持濕度穩定(通過在每個培養皿上蓋上蓋子),則可在無菌培養皿中制備試樣。在進行試驗之前,無菌地將試樣轉移至無菌瓶中。
2、試樣接種病毒
對于吸水性試樣,用微量移液器精準吸取0.2mL病毒懸液多點接種至樣品瓶中的試樣上,然后用瓶蓋密封樣品瓶。
對于疏水性織物試樣,用微量移液器精準吸取 0.2mL病毒懸液多點接種至50mmX50 mm的試樣上,再用另一塊50mmX50mm的樣片覆蓋,使試樣抗病毒處理面與病毒懸液充分接觸。對于疏水性纖維或紗線試樣,用微量移液器精準吸取0.2mL病毒懸液多點接種至50mmX50mm的試樣上,再用50mmX50mm的不影響病毒活性的塑料薄膜覆蓋,使試樣與病毒懸液充分接觸。
3、接觸時間
將樣品瓶放入培養箱,在25℃條件下培養2h。經相關方協商確定后可調整接觸時間,但不超過24h,并在試驗報告中注明。
4、接種后立即洗脫病毒
3個對照樣試樣接種病毒后,立即在樣品瓶中加入20mL的SCDLP液體培養基,然后將樣品瓶蓋上瓶蓋,用旋渦混合器振蕩5次,每次5s,將病毒從試樣中洗脫下來。
注:該病毒懸液將作為對照試樣的初始洗脫病毒懸液。
5、接觸時間后洗脫病毒
3個對照樣試樣和3個抗病毒試樣接觸2h后,在樣品瓶中加入20ml的SCDIP液體培養基,然后蓋上瓶蓋,用旋渦混合器振蕩5次,每次5s,將病毒從試樣中洗脫下來。
注:這些病毒懸液是與對照樣試樣和抗病毒試樣經接觸時間后的初始洗脫病毒懸液。
抗病毒活性試驗-國家檢驗檢測中心